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      高速離心機在質粒提取中的重要應用

      發布時間:2018-05-07 瀏覽次數:46

        質粒是基因工程中常用的運載體,擔負著將目的基因轉移到宿主細胞中的重要使命。高速離心機對從細菌中分離質粒有非常重要的作用。以下是一實驗室質粒提取的步驟,使用蜀科TD-20高速離心機進行操作:

       

      1、將擴增好的菌液重懸,轉入1.5mL離心管中;
      2、用質粒小量抽提試劑盒,按說明書要求提取質粒;
      3、細菌高速離心1min,*去除上清;
      4、加入250ulRB溶液,振蕩器充分懸浮細菌;
      5、加入250ulLB溶液。立即上下顛倒10次,使細菌裂解,室溫,放置2min;
      6、加入250ulNB溶液。立即上下顛倒10次,使之充分中和,室溫,放置2min;
      7、室溫,15000rpm,蜀科
      高速離心機離心15min;
      8、將吸附柱放入收集管內,離心得到的上清轉移吸附柱,室溫,15000rpm,蜀科高速離心機離心30s; 
      9、棄廢液,將吸附柱放入收集管,加入700uL WB溶液到吸附柱中,15000rpm,蜀科高速離心機離心30s;
      10、重復上一操作;
      11、將吸附柱放入干凈的1.5mL離心管中,加30-50uL預熱的Elution Buffer,室溫,放置2min,高速離心1min;
      12、樣品進行電泳檢測:1%瓊脂糖凝膠電泳,上樣量為2uL,紫外燈下觀察,明亮的帶為超螺旋形式,可以在一定程度上表明提取質粒的純度。

        質粒提取是基因工程基礎的一步,
      高速離心機的運用非常頻繁,蜀科高速離心機全系采用轉頭識別技術,有效防止轉頭超速運轉,保護機器和人員安全,技術性能位居*,歡迎選購!

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