蜀科實驗室離心機對外泌體的處理

 要想深挖外泌體的潛能，使其發(fā)揮更大的作用，必先獲得高純度、內(nèi)含物少丟失的外泌體樣本。小編為大家介紹一種快速并分離外泌體的方法——蜀科實驗室離心機分離法。
 

超速離心法是常用的外泌體純化手段，在以蜀科低速離心機離心除去掉死亡細(xì)胞和細(xì)胞碎片后，就通過蜀科高速離心機將大小相同的囊泡顆粒從可溶性分子如游離蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)復(fù)合物中沉淀并純化出來。重要的是，隨后要用PBS或新鮮生長培養(yǎng)基少一次的清洗外泌體，從而來減少其中游離的殘存蛋白。此外，所有離心步驟必須在4°C下進(jìn)行，借此來保持蛋白酶、DNase和RNases處于非活性狀態(tài)，也就是必須使用蜀科的冷凍實驗室離心機。

通常超速離心也會與蔗糖密度梯度（其密度從低到高的連續(xù)分布）或蔗糖墊（30% sucrose cushion）組合使用，即在離心機中以100,000-200,000 x g離心沉淀（含有外泌體）120分鐘，可使樣品中的外泌體應(yīng)將以1.13-1.19g/mL的蔗糖密度范圍內(nèi)進(jìn)行富集。

盡管這種強強聯(lián)手的方法可以獲得高度純化的外泌體，但也存在一些缺點。確實，超速離心的過程耗時耗力，且需要耗費大量的原料。而大的缺陷在于重復(fù)離心操作很有可能對外泌體的囊泡造成損害從而降低其質(zhì)量，又或者樣品中的可溶性蛋白可能與外泌體一起形成聚集體和團塊進(jìn)而產(chǎn)生污染。

蜀科實驗室離心機可以幫助大家獲得外泌體，而外泌體到手后要如何發(fā)光發(fā)熱，有興趣的朋友可以關(guān)注我們的公眾號：“shukeyiqi”來蜀科小編，我們可以為您提供數(shù)據(jù)庫，助您一臂之力。